紫外分光光度計,就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見光區任意選擇不同波長的光。物質的吸收光譜就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應地發生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量。
源興紫外分光光度計利用分光光度法對PCB制成中物質進行定量定性分析。而分光光度法則是通過測定被測PCB各種元素在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該PCB元素進行分析定量或定型分析。特點:具有操作簡單,維護方便,數據準確等特點。
紫外分光光度計的校正方法:分光光度法的zui重要的一個物理化學量是吸光度。為了獲得準確的研究結果,準確測得樣品溶液的吸光度是非常重要的。一般,分析結果的不可靠性與偶然誤差和系統誤差有關。偶然誤差影響測量的精密度,可通過足夠數量測量的統計處理來減少;系統誤差影響測量結果的準確度,可在大體相同實驗條件下,用比較一種物質的準確測量結果,使系統誤差統一起來。
而分光光度計的系統誤差(波長校正、分光光度計的慢散光、放大器的線性響應、暗電流和比色皿的光程)和操作誤差(溫度改變、儀器讀數、操作者的改變、使用物質的純度、稱量和濃度、pH)對測量吸光度的影響是可以檢查和校正的。關于操作誤差,多數情況下,通過嚴格按操作程序測量、儀器調零、準確稱量等來控制或減少這種誤差的產生。關于儀器的系統誤差,可通過對分光光度計的定期校正來克服,若所需準確度很高的測量,則必須天天校正。
校正內容:
1、波長的準確度試驗以儀器顯示的波長數值與單色光的實際波長值之間誤差表示,應在±1.0nm范圍內。
2、吸收度的準確度試驗;
3、雜散光的試驗;
4、波長重現性試驗;
5、分辨率試驗。
吸光度的校正方法:校正吸光度常用一很純物質一定濃度的溶液為標準,且此溶液的吸光度系數經不同實驗室核對,為了使標準液吸光度不受測定波長的微移動而有改變,常選擇具有較平滑吸收高峰的物質,同時要求溶液穩定,且在相當的波長范圍內吸收度的改變符合Beer-Lambert定律,常用硫酸銅、硫酸銨鈷和硝酸鈉或鉀的溶液。鉻酸鉀溶液是zui常用的標準溶液,此溶液在紫外區和可見區均適用。
波長或波數的校正方法:可用具有窄吸收帶的溶液,濾光片或蒸氣來校正所需要的光波范圍。如果要求很高的精密度時,可用放電燈泡發射的射線來校正。有的光譜儀其上已裝有一個為校正用的燈。苯的蒸氣對校正一定范圍的波長亦很有用,可用一小滴苯放于一厘米厚的吸收杯中,測其吸收波長,在遠紫外區可用氧氣的吸收帶進行校正。用各種稀土金屬的濾光片,可以很快地校正波長,但準確度不如上述方法高。常用含有鈥和釹、鐠離子的濾光片。
雜散光的校正方法:小量的雜散光往往會引起較大的測量誤差,它的校正可用一個能完全吸收某一波長單色光,且在其他波長吸收很弱的溶液。從這個溶液所表現的透光情況可推測雜散光的近似值。由雜散光帶來的偽吸收帶,亦可用Beer-Lambert定律來檢查,但用此定律檢查偽吸收帶誤差較大。由切斷范圍之外所表現的透射比可得出近似的雜散光百分數。若所含雜散光大于0.1%,應設法減低,或對測得的吸收光度進行校正。由雜散光引起的誤差與雜散輻射成正比,因此校正值很容易從化合物的近于正確的曲線計算而得。此外,還可用一個適當的濾光片,該濾光片在測定波長范圍內完全透光,但吸收此范圍外的光波,由此來消除雜散光。
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